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病毒包裝服務

        在將外源基因?qū)氚屑毎蚪M織的過程中,病毒的轉(zhuǎn)導效率比真核生物表達載體高很多,特別適合于介導外源基因在難轉(zhuǎn)染甚至無法轉(zhuǎn)染細胞中的表達。

1.慢病毒服務

        慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷1型病毒)為基礎發(fā)展起來的基因治療載體。它能高效的將目的基因(或RNAi)導入動物和人的原代細胞或細胞系。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細胞、長期穩(wěn)定表達外源基因等優(yōu)點。慢病毒表達載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。目的基因進入到宿主細胞之后,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達效應分子。

圖:慢病毒介導的基因過表達原理示意圖
 
圖:GFP融合標簽的過表達慢病毒感染目標細胞在熒光顯微鏡下的感染效率

2.腺病毒服務

        腺病毒作為進行基因轉(zhuǎn)移和表達的工具,是一種無包膜的雙鏈線性DNA病毒,其直徑約為90-100nm,衣殼為廿面體,包含240個六鄰體和12個五鄰體。基因組長度約為36kb,兩端各有一個103bp的反向末站重復序列(ITR),參與病毒DNA的復制,其復制不依賴于宿主細胞的分裂。
        相較于細胞轉(zhuǎn)染和其他病毒運載系統(tǒng),腺病毒主要具有以下特點:①感染細胞的種類多,覆蓋了除抗腺病毒感染的淋巴瘤細胞之外的大部分細胞;②感染細胞的效率高:攜帶的目的基因表達高效;③病毒可達到的滴度高,我們公司腺病毒滴度能夠達到1010pfu/ml,能滿足普通細胞實驗要求,也能提供高滴度腺病毒,能夠達到1011pfu/ml;④制備便捷,擴增容易;⑤無插入致突變性:無需整合在染色體中;⑥病毒保存的穩(wěn)定性高:-80℃不反復凍融的情況下能夠保存兩年。

圖:腺病毒實驗結(jié)果示例