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全身性基因敲除

        全身性基因敲除小鼠是研究基因在動(dòng)物體內(nèi)功能的基礎(chǔ)技術(shù),其在生物醫(yī)學(xué)研究中有廣泛的應(yīng)用,本公司可提供快速成熟的全身性基因敲除小鼠制作服務(wù)。
        常規(guī)的基因敲除步驟如下:應(yīng)用基因編輯技術(shù)對(duì)靶位點(diǎn)DNA進(jìn)行切割,引發(fā)DNA雙鏈斷裂,誘發(fā)非同源末端連接修復(fù)DNA,在此過(guò)程中往往會(huì)產(chǎn)生DNA的插入或刪除,造成移碼突變,打亂原基因讀碼框,致使該基因功能喪失,從而實(shí)現(xiàn)基因敲除。全身性基因敲除技術(shù)應(yīng)用的前提是該靶基因的缺失不會(huì)導(dǎo)致胚胎致死。

圖:基因敲除示意圖
1.1. 特定區(qū)域敲除
        
        在生物體內(nèi),同一個(gè)基因的不同轉(zhuǎn)錄本可能編碼多個(gè)同源蛋白異構(gòu)體(isoform),而不同的isoform的功能可能有所不同,為研究靶基因特定isoform在體內(nèi)的功能和相關(guān)表型,往往需要特異性敲除其轉(zhuǎn)錄本。通過(guò)對(duì)基因的特定區(qū)域進(jìn)行敲除,從而實(shí)現(xiàn)破壞其特異性轉(zhuǎn)錄本的目的。


特定區(qū)域(外顯子)敲除示意圖
1.2. 長(zhǎng)鏈非編碼RNA敲除(lncRNA)

        長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)指的是長(zhǎng)度在200nt以上、不編碼蛋白、但參與細(xì)胞內(nèi)多種生物學(xué)過(guò)程的RNA分子。大量研究提示著非編碼區(qū)域可能通過(guò)表達(dá)lncRNA,活躍地參與到生物學(xué)功能的調(diào)控中。由于大多數(shù)長(zhǎng)鏈非編碼RNA在物種之間沒有明顯的序列保守性,對(duì)lncRNA進(jìn)行堿基替換、插入或缺失部分序列時(shí)仍能表現(xiàn)出其原有的生物學(xué)活性,因此lncRNA功能的缺失需要通過(guò)對(duì)這段保守的區(qū)域的精準(zhǔn)敲除來(lái)完成。
        本公司可根據(jù)客戶需求,定制特定區(qū)域敲除/非編碼RNA敲除(lncRNA)基因工程鼠。