轉(zhuǎn)基因服務(wù)
為研究特定基因在動(dòng)物體內(nèi)的功能，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將外源基因?qū)氲酱?小鼠基因組中穩(wěn)定表達(dá)并進(jìn)行相應(yīng)的表型實(shí)驗(yàn)是目前生命科學(xué)研究廣泛應(yīng)用的手段之一。
應(yīng)用最廣泛的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物制作方法，是通過顯微操作儀將外源DNA直接注入受精卵原核內(nèi)，使外源DNA整合到動(dòng)物的受精卵基因組中，從而發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。本公司通過該技術(shù)向客戶提供傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因鼠定制與定點(diǎn)轉(zhuǎn)基因鼠定制服務(wù)。
1.1. 特定啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的轉(zhuǎn)基因模型
圖：轉(zhuǎn)基因載體示意圖
常規(guī)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體包含目的基因以及上游啟動(dòng)子和篩選標(biāo)簽等元件。利用原核顯微注射的方法將表達(dá)載體注射到小鼠受精卵中，可實(shí)現(xiàn)目的基因整合進(jìn)小鼠基因組。通過構(gòu)建含有廣泛性/組織特異性等不同啟動(dòng)子的表達(dá)載體，可以實(shí)現(xiàn)外源基因在組織中廣泛性或特異性的表達(dá)，從而研究目的基因的功能。1.2.基于Cre/loxP的條件性轉(zhuǎn)基因模型
圖：基于Cre/loxP的條件性轉(zhuǎn)基因示意圖
在一些研究中，研究者希望轉(zhuǎn)入的外源基因只在特定組織或特定時(shí)期表達(dá)，我們可以通過構(gòu)建廣泛表達(dá)啟動(dòng)子-loxP-stop-loxP-轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體，制備條件性轉(zhuǎn)基因大/小鼠模型。在條件性轉(zhuǎn)基因模型中，外源基因在正常情況下并不表達(dá)，只有與相應(yīng)的組織特異性表達(dá)Cre或誘導(dǎo)型Cre鼠雜交后，在Cre-loxP系統(tǒng)的作用下，Stop終止序列的作用在特定的組織或時(shí)期中被去除，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因在特定組織/特定時(shí)期中特異性表達(dá)。