品圖片-網(wǎng)頁展示/紅細胞裂解液BLCK015-500ML.jpg)
產(chǎn)品名稱：紅細胞裂解液
產(chǎn)品編號：BLCK015-250ML/BLCK015-500ML
產(chǎn)品規(guī)格：250ML/500ML
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說明書 |
產(chǎn)品情況：本產(chǎn)品紅細胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer，或稱ACK Lysis Buffer），是一種經(jīng)典的用于去除紅細胞的裂解液，在不損傷有核細胞的前提下充分去除紅細胞。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞，可進一步用于原代培養(yǎng)、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離及提取等。其基本原理是利用細胞內(nèi)滲透壓濃度差而導(dǎo)致細胞膜脹破的原理裂解紅細胞。主要成分包含氯化銨、碳酸氫鉀、EDTA-Na2。因銨根離子無法通過細胞膜，而其他離子可以通過，造成細胞內(nèi)外的離子濃度差異，外部水分?jǐn)U散至細胞內(nèi)，使紅細胞膨脹，達到裂解效果。本產(chǎn)品經(jīng)0.2μm濾膜過濾除菌。
儲存運輸：冰袋（wet ice）運輸；4℃保存，有效期12個月。
使用說明：
組織細胞樣品：
（一）新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液；
（二）按1:3-5比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2 min；
（三）800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
（四）收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
（五）如裂解不完全可重復(fù)步驟二和三；
（六）根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟四開始使用DEPC水配制的溶液。
血細胞：
（一）新鮮抗凝血，離心棄去上清液；
（二）按1:6-10比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-5 min；
（三）800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
（四）收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
（五）如裂解不完全可重復(fù)步驟二和三；
（六）根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟四開始使用DEPC水配制的溶液進行。
注意事項：
（一）本品經(jīng)過濾除菌，使用時請注意無菌操作，避免細菌污染。
（二）后續(xù)試驗如是用于細胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意在超凈工作臺中完成，并注意無菌操作，以免細胞被污染，影響細胞培養(yǎng)。
（三）在離心洗滌后，如發(fā)現(xiàn)極微量的紅細胞，可繼續(xù)試驗，不會影響后續(xù)檢測。
（四）操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷！