產(chǎn)品名稱:ECL超靈敏化學發(fā)光檢測試劑盒(飛克級)
產(chǎn)品編號:BLWB021
產(chǎn)品規(guī)格:
產(chǎn)品組成 | BLWB021-100ML | BLWB021-250ML |
ECL FemtoLight Substrate | 100 mL | 250 mL |
ECL FemtoLight Oxidant | 100 mL | 250 mL |
說明書 | 1份 | 1份 |
說明書 |
產(chǎn)品情況:ECL超靈敏化學發(fā)光檢測試劑盒是一款非放射性的化學發(fā)光系統(tǒng),可用于檢測結(jié)合到膜上的蛋白所偶聯(lián)的辣根過氧化物酶 (HRP) 的活性。本產(chǎn)品包括增強的魯米諾底物和穩(wěn)定的過氧化物體系,能檢測低至飛克級的微量蛋白,適用于常規(guī)Western Blot的化學發(fā)光。
ECL化學發(fā)光試劑盒分BLWB016 ECL基礎化學發(fā)光試劑盒和BLWB021 超敏ECL化學發(fā)光試劑盒。對于豐度較高的目的蛋白檢測,例如內(nèi)參蛋白等,推薦使用BLWB016,該產(chǎn)品可檢測低至皮克量的蛋白;而對于低豐度較難檢測的目的蛋白,推薦使用BLWB021,該產(chǎn)品可檢測到低至飛克量的蛋白,且發(fā)光更穩(wěn)定。
儲存運輸:冰袋運輸;
2-8℃避光保存,保質(zhì)期 12個月;
如果長期不用,可以-20℃保存。
注意事項:
(一)100 mL 規(guī)格可供1000cm2的轉(zhuǎn)印膜使用;
(二)ECL FemtoLight Substrate和ECL FemtoLight Oxidant在吸取過程中必須要更換吸頭,相互污染后會導致底物和過氧化物逐漸失效;
(三)金屬離子的污染會降低本試劑的靈敏度,請注意用干凈吸頭;
(四)NaN3會抑制HRP的活性,因此二抗的保存或回收應避免使用NaN3;
(五)ECL FemtoLight Substrat及發(fā)光工作液應避免強光照射,強光照射會導致靈敏度降低;
(六)ECL發(fā)光液靈敏度很高,如果出現(xiàn)背景升高的現(xiàn)象,可能是使用的一抗或二抗?jié)舛冗^高會造成;
(七)如果熒光迅速淬滅,可能原因是目的條帶熒光過強,導致HRP迅速消耗ECL;
(八)如果沒有發(fā)光信號,可能是目的蛋白表達很弱,可延長壓片時間;
(九)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
實驗流程:
(一) 從洗滌緩沖液中取出轉(zhuǎn)印膜,瀝去多余的液體,保持膜處于濕潤狀態(tài);
(二) 等體積混勻 ECL FemtoLight Substrate 和 Oxidant ,配制化學發(fā)光工作液(每平方厘米的轉(zhuǎn)印膜約需0.1 mL的工作液),現(xiàn)配現(xiàn)用,2天內(nèi)使用;
(三) 將化學發(fā)光液均勻滴到膜上,反應1-2 min。如要檢測的蛋白信號很高時,請盡量不要讓化學發(fā)光工作液處于靜止狀態(tài),可將加了工作液的膜置于搖床上混動1-2 min,以避免局部的反應物過度消耗,影響檢測信號的線性范圍;
(四) 取出膜,瀝去多余的發(fā)光工作液,將膜包裹于透明的保護夾中;
(五) X光片曝光:在暗室中將膜對X光片曝光。曝光時間從幾秒到幾分鐘不等;將底片顯影,如有必要,可根據(jù)顯影結(jié)果調(diào)整曝光時間進行第二次曝光;
CCD成像儀:無需將膜置于保護夾中,可直接用于拍照,拍照按儀器使用說明進行;
(六) 使用過的膜可剝離抗體后進行多次雜交。
本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷!