慢性病毒包裝服務
慢病毒（Lentivirus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷1型病毒）為基礎發(fā)展起來的基因治療載體。它能高效的將目的基因（或RNAi）導入動物和人的原代細胞或細胞系。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細胞、長期穩(wěn)定表達外源基因等優(yōu)點。慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質?？商峁┧械霓D錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒，需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞，在細胞中進行病毒的包裝，包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中，離心取得上清液后，可以直接用于宿主細胞的感染，目的基因進入到宿主細胞之后，經(jīng)過反轉錄，整合到基因組，從而高水平的表達效應分子。
服務優(yōu)勢
1）第三代慢病毒包裝系統(tǒng)，安全性更高
2）17000個現(xiàn)貨cDNA克隆可在2-3天由穿梭載體克隆至慢病毒載體,2周即可交付慢病毒
3）多種慢病毒載體可供選擇，C-端或N-端帶有熒光標記（GFP、RFP)和親和標簽
4）可根據(jù)客戶要求提供不同滴度（高或低）的慢病毒產(chǎn)品
5）嚴格的質量控制：基因特異引物檢測、Real-time PCR病毒滴度測定
6）可將您感興趣的任何基因克隆至我們的慢病毒載體進行慢病毒生產(chǎn)
7）可提供從慢病毒載體構建、慢病毒包裝到穩(wěn)轉細胞系構建一站式服務
服務流程
服務周期
| 技術內容 | 周期 | 交付內容 | |||
| gRNA 設計及合成 | 1~2周 |
1）3個gRNA構建 2）測序報告 3）質粒結構圖譜 4）質檢報告 5）10ug/載體研究級別質粒 |
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| 載體構建 | 克隆至需求載體 | ||||
| 質粒測序 | |||||
| 質粒制備 | |||||
| 病毒制備(針對慢病毒載體) | 2~3 周 |
1）單克隆細胞株 2）gRNA靶點序列及目標區(qū)域測序報告 3）質檢報告 |
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| 轉染 | 穩(wěn)定轉染 | ||||
| 病毒侵染 | |||||
| FACS分選 | |||||
| 單克隆制備及細胞建庫 | 單克隆制備 | 5~8 周 | |||
| PCR鑒定 | |||||
| 測序分析 | |||||
| 細胞建庫 | |||||
| 鑒定(可選) | qPCR | 2~3 周 | |||
| Western Blot | |||||
應用案例
Fig. 質粒測序峰圖? 
Fig. 質粒測序結果分析
Fig. 細胞上清支原體檢測結果
Fig. 待轉染質粒鑒定結果
Fig. GFP融合標簽的過表達慢病毒產(chǎn)品感染目標細胞